產品說明

• 帽子結構是指在真核生物中轉錄后修飾形成的成熟mRNA在5'端的一個特殊結構，是在RNA三磷酸酶，mRNA鳥苷酰轉移酶，mRNA甲基轉移酶催化下形成。該結構對 mRNA 的穩定性、轉運及翻譯過程均有重要作用，是mRNA在體內發揮生物學功能必不可少的元件。
• 本品是一種經過基因工程改造的重組mRNA加帽酶，分子量約99KDa，同時具備RNA 三磷酸酯酶、鳥苷酰基轉移酶和鳥嘌呤甲基轉移酶三種酶活性，在合適濃度的加帽緩沖液（Capping buffer），鳥苷三磷酸（GTP），S－腺苷甲硫氨酸（SAM）等條件下，可在一個小時之內完成 mRNA 加帽，在mRNA 的 5'末端形成Cap0 帽子結構，如與二氧甲基轉移酶共同使用，可進一步形成Cap1 帽子結構。
• 本品按照 GMP要求生產，產品以無菌液體形式提供，可應用于mRNA 的加帽反應或 mRNA 的5'末端標記反應。

產品包裝

活性定義

在37℃、pH8.0的條件下，30分鐘內將75 pmol的20nt RNA轉化為Cap-0 RNA所需的酶量定義為1個活性單位。

保存體系

保存溫度：-20℃，或-80℃長期保存。

注意事項 

1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作；實驗操作需要注意全程保持無RNA酶環境，防止RNA降解。 
2. 所提取的 RNA 需經過純化并使用無核酸酶水溶解； 
3. 在加帽反應前需進行 RNA變性 以去除 5'末端的二級結構； 
4. 對于已知 5'末端結構的 RNA，可延長反應時間至 60 分鐘，以提高加帽率； 
5. 為增強RNA的穩定性，可在反應體系中額外添加RNA酶抑制劑（終濃度為1U/μl）。
6. SAM在pH7~8、37℃環境下穩定性較差，加入反應體系前需要保持在冰上。

參考反應體系（20μl）

37℃反應30分鐘